O que são proteínas plasmáticas

O plasma sanguíneo humano contém proteínas com uma concentração total de aprox. 7 g / dl. Alterações na concentração de proteínas plasmáticas e sua abundância relativa podem variar no curso de doenças e fornecem importantes pistas diagnósticas.

A classificação das proteínas presentes no plasma é bastante complexa devido à sua grande variedade. É importante distinguir entre aquelas proteínas que estão presentes no plasma porque é onde elas exercem sua função fisiológica, e aquelas que estão acidentalmente presentes no plasma por causa da morte das células em cujo citoplasma exercem sua função fisiológica.

Como todas as células do nosso corpo estão sujeitas a algum volume de negócios, o achado de baixos níveis de enzimas intracelulares no plasma não tem significância diagnóstica; mas grandes aumentos desses níveis sugerem doença aguda com morte celular (por exemplo, infarto do miocárdio, hepatite viral, etc.). A maioria das proteínas fisiologicamente presentes no plasma sanguíneo é produzida pelo fígado.

Algumas proteínas que representam o papel fisiológico no plasma:

  • Albumina (produzida pelo fígado): um transportador de substâncias pouco solúveis;
  • Transportadores específicos (por exemplo, transferrina, ceruloplasmina, transcortina, haptoglobina …);
  • Factores de coagulação (produzidos pelo fígado);
  • Complexo de imunoglobulinas (produzido pelas células plasmáticas);
  • (produzido pelo fígado ou por macrófagos);
  • Lipoproteínas (produzidas pelo intestino e modificadas pelo fígado);
  • Hormonas proteicas (produzidas pelas glândulas endócrinas);
  • Inibidores da protease.

Algumas proteínas plasmas liberadas pela morte das células:

  • Aminotransferases sGOT (AST); TGPT (ALT): normalmente nas células do fígado;
  • Citocromo c (músculo esquelético, coração);
  • Lactato desidrogenase (coração, rim, fígado, músculo esquelético);
  • Creatina Fosfoquinase (coração, músculo esquelético, cérebro);
  • Hemoglobina livre (libertada pelos eritrócitos durante crises hemolíticas) ) Fosfatase alcalina de
    amilase.

A degradação e a remoção das proteínas plasmáticas podem ocorrer através de pelo menos três mecanismos diferentes: (i) a maioria das proteínas fisiologicamente presentes no plasma, e algumas daquelas presentes por causa da morte celular são removidas por macrófagos, células Kuppfer e outras células de eliminação, digerido a aminoácidos e reciclado no sangue nesta forma; (ii) proteínas de baixo peso molecular (PM <30-50 KDa).

São filtradas pelo rim e aparecem na urina; muitos dos hormônios protéicos e das proteínas liberadas pela morte celular se enquadram nessa categoria; (iii) um pequeno número de proteínas plasmáticas é removido por consumo específico (por exemplo, fibrinogênio) ou transferido para os fluidos extracelulares.

Métodos para estudo de proteínas plasmáticas

Concentração protéica totalé estimado usando as reações características de alguns aminoácidos ou da ligação peptídica, e aplicando fatores de conversão específicos. O método clássico de Kjeldahl, consistindo na liberação de nitrogênio como amônia e titulação do último composto, não é mais usado porque é caro e demorado. O biureto é um reagente de cobre que permite a complexação do metal com a ligação peptídica.

O produto resultante é azul e sua concentração pode ser determinada espectrofotometricamente. O método de Lowrymede a concentração de tirosina usando um reagente para fenóis (ácido fosfotungstomolibdico), que novamente produz um complexo azul cuja concentração é medida por espectrofotometria de absorvância. O valor médio da concentração total de proteína em indivíduos saudáveis ​​é de 7 g / dL.

A eletroforese é o método de escolha para o fracionamento de proteínas:

Uma pequena quantidade do soro ou plasma em análise é adsorvida numa tira de acetato de celulose equilibrada num tampão alcalino; os eletrodos positivos e negativos são conectados às extremidades da tira e a corrente é aplicada para atrair as proteínas para o eletrodo positivo.

Quanto mais carregada negativamente é a proteína, e quanto menor a sua dimensão, mais rapidamente se move (deve ser lembrado que a pH alcalinizante, os grupos ionizáveis ​​das cadeias laterais dos aminoácidos são desprotonados, daí a carga negativa da proteína).

como tomar

As proteínas adsorvidas na tira são fixadas e coradas com um corante adequado e a sua concentração é medida usando um espectrómetro de reflectância. O gráfico resultante pode ser usado para quantificar os picos de reflectância, daí as concentrações relativas de proteína no soro ou plasma. A albumina é a proteína mais rápida e forma uma faixa afiada; uma vez que esta banda consiste essencialmente de uma única espécie química, a sua quantificação é muito simples.

As frações de globulinas alfa1 e alfa2 são menos móveis que a albumina, seguidas pela fração globulina beta. Essas frações não correspondem a espécies químicas puras e muitas proteínas diferentes co-migram nas bandas alfa1, alfa2 e beta. Por essa razão, a quantificação dessas bandas no eletroferograma apenas fornece uma informação muito genérica.

O componente proteico mais lento é custeado pelas gamaglobulinas e corresponde essencialmente aos anticorpos; aumenta-se no decorrer de infecções bacterianas crônicas (aumento policlonal) ou no decorrer do mieloma múltiplo (formando um pico agudo monoclonal). uma vez que esta banda consiste essencialmente de uma única espécie química, a sua quantificação é muito simples.

As frações de globulinas alfa1 e alfa2 são menos móveis que a albumina, seguidas pela fração globulina beta. Essas frações não correspondem a espécies químicas puras e muitas proteínas diferentes co-migram nas bandas alfa1, alfa2 e beta.

ovo

Uma lista de alguns importantes proteínas no plasma

Albumina é a proteína presente na maior concentração no plasma sanguíneo (3,5-5,5 g / dL, representando mais de metade da concentração total de proteína). A albumina é um transportador não específico de substâncias pouco solúveis (por exemplo, bilirrubina não conjugada, hormônios esteróides, heme, drogas, etc.) e é produzido pelo fígado. Diversas variantes genéticas são conhecidas.

A albumina é solúvel em água destilada, bem como em soluções salinas fisiológicas, e é rica em aminoácidos ácidos que conferem a ela um ponto isoelétrico baixo (aprox. 4,5); Como consequência, a eletroforese migra rapidamente em direção ao eletrodo positivo e muito poucas proteínas plasmáticas se movem mais rápido que a albumina (por exemplo, pré-albumina, o veículo específico para os hormônios da tireoide). A albumina é produzida pelo fígado e sua meia-vida circulante é de aprox. 20 dias.

como tomar

A concentração de albumina é aumentada em todas as condições clínicas causando hemoconcentração (por exemplo, vômitos, diarréia, queimaduras graves, etc.); diminui durante as doenças crônicas do fígado (devido à biossíntese prejudicada), na síndrome nefrótica (devido à perda na urina) e na desnutrição grave.

Como a albumina é o principal determinante da pressão coloido-osmótica do sangue, a hipoalbuminemia é geralmente associada a edema e ascite, especialmente se a hipoalbuminemia for devida a uma doença hepática que causa hipertensão portal (por exemplo, cirrose).

A medida da concentração de albumina é feita diretamente no protidograma eletroforético, dada a característica mobilidade eletroforética e a grande abundância relativa.

Haptoglobinaé produzido pelo fígado. Liga-se à hemoglobina livre produzida pela hemólise das hemácias impedindo a reação do ferro heme com o oxigênio, que pode produzir espécies reativas de oxigênio (EROs).

  • A hemopexina é produzida pelo fígado. Liga-se ao heme livre e impede suas reações com o oxigênio.
  • A transferrina é produzida principalmente pelo fígado e tem a função de transportar ferro.
  • A ceruloplasmina é produzida pelo fígado e tem a função fisiológica de transportar cobre. Na eletroforese migra com a fração de globulina alfa2

Inibidores de protease. O plasma sanguíneo contém várias proteínas que atuam como inibidores de serina-proteases, em particular de tripsina, quimotripsina e enzimas pancreáticas relacionadas. Estes são chamados coletivamente de serpinas (para inibidores de protease SERINE).

As enzimas pancreáticas podem ocasionalmente ser absorvidas no sangue. Como essas enzimas são capazes de promover a coagulação do fibrinogênio e causariam coagulação intravascular difusa e vários outros efeitos adversos, é importante que o plasma seja capaz de neutralizar sua atividade.

Os inibidores de protease mais importantes fisiologicamente presentes no sangue são alfa1 antitripsina , alfa1 antiquimotripsina e alfa2 macroglobulina.

Complemento é um sistema de várias proteínas plasmáticas que migram na fração eletroforética das beta-globulinas e desempenha uma função na defesa contra infecções. As proteínas do complemento circulam no sangue na forma de precursores inatoativos e, quando ativadas, adquirem atividades enzimáticas (principalmente como esterases) que lhes permitem danificar a bicamada lipídica da membrana celular (bacteriana). Resposta excessiva do complemento também pode danificar as células do organismo.

O complemento é ativado pelos complexos antígeno-anticorpo; pela proteína C-reativa; e por alguns fungos, bactérias e vírus. Há também uma via de activao alternativa, ECT não envolve imunocomplexos e requer insteda a proteína de soro específico properdina. Sabe-se que vários defeitos genéticos do complemento causam maior propensão a doenças infecciosas.